當(dāng)水中的亞硝酸鹽氮過高，飲用此水將和蛋白質(zhì)結(jié)合形成亞硝胺，是一種強(qiáng)致癌物質(zhì)，長(zhǎng)期飲用對(duì)身體極為不利。而且氨氮在厭氧條件下，也會(huì)轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽氮；飲用水中硝酸鹽氮在人體內(nèi)經(jīng)硝酸還原菌作用后被還原為亞硝酸鹽氮，毒性將擴(kuò)大為硝酸鹽毒性的11倍，主要影響血紅蛋白攜帶氧的能力，使人體出現(xiàn)窒息現(xiàn)象。
總氮是反映水體富營(yíng)養(yǎng)化的主要指標(biāo)。太湖水污染事件的發(fā)生，讓監(jiān)管部門重新認(rèn)識(shí)到了總氮的危害性。掌握總氮排放量、分布狀況以及主要來源，對(duì)控制水體富營(yíng)養(yǎng)化、改善水質(zhì)具有十分重要的意義。
5.1 采樣
在水樣采集后立即放入冰箱中或低于4℃下保存，但不得超過24小時(shí)。水樣放置時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，可在1000ml水中加入約0.5ml硫酸（ρ=1.84g/ml），酸化到PH=2，并盡快測(cè)定。
5.2 試樣的制備
取樣品（5.1）用氫氧化納溶液（3.2）或硫酸溶液（3.8）調(diào)節(jié)至pH5—9。
如果試樣不含懸浮物按（6.1.2）步驟測(cè)定，試樣含有懸浮物則按（6.1.3）步驟測(cè)定。
6 分析步驟
6.1 測(cè)定
6.1.1 用吸管取10.00ml試樣（氮含量超過100μg時(shí)可減少取樣量并加入純水至10ml）于干比色管中。
6.1.2 試樣不含懸浮物時(shí)，按下列步驟進(jìn)行。
a 加入5ml堿性過硫酸鉀溶液（3.3），上塞并用紗布和線包扎緊，以防彈出。
b 將盛有試樣的比色管置于醫(yī)用高壓蒸汽滅菌器中，加熱，使壓力表指針到1.1—1.4kg/cm2,此時(shí)溫度達(dá)120—140℃后開始計(jì)時(shí)，或?qū)⒈壬苤糜诩矣酶邏哄佒校訜嶂另攭洪y吹氣時(shí)計(jì)時(shí)，保持半個(gè)小時(shí)。
c 冷卻至室溫，取出比色管。
d 加鹽酸（3.4）1ml，用純水稀釋至標(biāo)線，混勻。
e 移取部分溶液至石英比色管中，在紫外分光光度計(jì)上，以純水作參比，分別在波長(zhǎng)為220和275nm處測(cè)定吸收度，并用（1）式計(jì)算出校正吸收度A。
6.1.3試樣含懸浮物時(shí)，先按上述6.1.2中a至d步驟進(jìn)行。然后待澄清后，移取上述清液同6.1.2.e步驟測(cè)定。
6.2空白試驗(yàn)
空白試驗(yàn)除以10ml純水代替樣品外，采用與6.1.2完全一致的步驟進(jìn)行?？瞻自囼?yàn)的A值不超過0.03。
6.3 校準(zhǔn)
6.3.1 工作曲線校準(zhǔn)系列的配制
a 用分度吸管向一組比色管分別加入硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.6）0.0、0.50、 1.00、 2.50、5.00、7.50、10.00ml，加純水稀釋至10.00ml。
b 按6.1.2a至e步驟進(jìn)行測(cè)定。
6.4 工作曲線的制作
標(biāo)準(zhǔn)溶液及空白溶液在220nm和275nm處測(cè)得的吸收值按下列公式計(jì)算
AS=AS220-2AS275 （2）
Ab=Ab220-2Ab275 （3）
式中：AS220——標(biāo)準(zhǔn)溶液在220nm波長(zhǎng)的吸收光度。
AS275——標(biāo)準(zhǔn)溶液在275nm波長(zhǎng)的吸收光度。
Ab220——空白（零濃度）溶液在220nm波長(zhǎng)的吸收光度。
Ab275——空白（零濃度）溶液在275nm波長(zhǎng)的吸收光度
校正吸光度Ar
Ar=AS—Ab （4）
按Ar值與相應(yīng)的NO3-N含量（μg）用電腦或用具統(tǒng)計(jì)功能的計(jì)數(shù)器進(jìn)行線性回歸統(tǒng)計(jì)計(jì)算獲取工作曲線1。
7 結(jié)果的表示
按式（1）計(jì)算得試樣吸光度并扣除空白Ab獲校正Ar吸光度，用校準(zhǔn)曲線算出相應(yīng)的總氮m（μg）數(shù)，式樣總氮含量按下式計(jì)：
總氮（mg/L）=m/V (5)
式中：m——試樣測(cè)出含氮量，μg；
V——測(cè)定用試樣體積，ml。
8 注意問題
（1）溶解性有機(jī)物對(duì)紫外光有較強(qiáng)的吸收，雖使用了雙波長(zhǎng)測(cè)定扣除法以校正，但不同樣品其干擾強(qiáng)度和特性不同，“2A275”校正值僅是經(jīng)驗(yàn)性的，有機(jī)物中氮未能完全轉(zhuǎn)化為NO3——N對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響也使“2A275”值帶有不確定性。樣品消化完全者，A275值接近于空白值。
（2）溶液中許多陽(yáng)離子和陰離子對(duì)紫外光都有一定的吸收，其中碘離子相對(duì)總氮含量的2.2倍以上，溴離子相對(duì)于總氮含量的3.4倍以上有干擾。
（3）樣品在于處理時(shí)要防止空氣中可溶性含氮化合物的污染，檢測(cè)室應(yīng)避開氨或硝酸等揮發(fā)性化合物。
